ساخت وکتور آدنوویروسی بیان کننده ژن tbid تحت کنترل پروموتر میدکاین در رده ی سلولی hepg2

thesis
abstract

یکی از انواع سرطان های شایع در جهان، هپاتوسلولارکارسینوما می باشد که در حال حاضر درمان موثری علیه آن وجود ندارد. از راهکارهای درمانی نویدبخش، ژن درمانی با استفاده از وکتورهای آدنوویروسی است که برای انسان بی خطر می باشند. در این مطالعه سازه ی آدنوویروسی نوترکیب تولید شد که در آن یک ژن کشنده تحت کنترل پروموتر اختصاصی سلول های توموری قرار گرفت. میدکاین یک فاکتور رشد متصل شونده به هپارین است که در سلول های توموری بیان بالایی دارد. tbid ، ژن پروآپوپتوز، یک واسطه ی کلیدی در هر دو مسیر آپوپتوز، مسیر میتوکندریایی و مسیر وابسته به گیرنده ی مرگ می باشد. از توالی پروموتری میدکاین برای بیان اختصاصی tbid در رده ی سلول های hepg2 و القای آپوپتوز در آنها استفاده شد. ابتدا پروموتر غیر اختصاصی cmv از آدنووکتور شاتل حذف شد. قطعه mk-tbid در سازه ی pcmk-tbid با روش touchdown pcr تکثیر و سپس در آدنووکتور شاتل pad-?cmv-gfp کلون گردید. بیان موقت tbid با ترانسفکشن سلول های hepg2 با آدنووکتور شاتل pad-mk-tbid-gfp و روش rt-pcr تأیید شد. این آدنووکتور شاتل و پلاسمید اصلی آدنوویروس به طور همزمان به سویه bj5183 منتقل شد. سازه ی آدنو ویروس نوترکیب درنتیجه ی فرآیند همولوگوس ریکامبینیشن بین آدنو وکتور شاتل و پلاسمید اصلی آدنوویروس، ایجاد گردید که صحت این سازه با روش هضم آنزیمی با آنزیم های مختلف و pcr تائید شد. در مرحله ی نهایی با ترانسفکشن سلول های بسته بندی کننده hek 293 با سازه ی آدنوویروسی خطی شده، پارتیکل های آدنوویروسی نوترکیب تولید شد. تولید پارتیکل های آدنوویروسی با ظهور اثرات سایتوپاتیک و بررسی پلاک های gfp 5 تا 7 روز بعد از ترانسفکشن این سلول ها با میکروسکوپ فلورسانس تأیید شد.

similar resources

ساخت سازه حاوی ژن tbid تحت کنترل پروموتر میدکاین و بررسی بیان آن در رده سلولی hepg2

سرطان کبد (hcc) یکی از سرطانهای شایع دنیاست که به علت کمبود راهکارهای درمانی مناسب آمار مرگ و میر ناشی از آن بسیار بالاست. امروزه ژن درمانی امیدهای تازه ای برای درمان این سرطان ایجاد کرده است. مزیت بزرگ ژن درمانی، هدفمند عمل کردن آن است یعنی میتواند راهکارهایی اتخاذ گردد که از طریق آن فقط سلولهای سرطانی از بین برود. میدکاین یک فاکتور رشد و تمایز است که در بسیاری از سرطانها دچار بیش بیان میگردد ...

15 صفحه اول

طراحی، ساخت و بیان وکتور نوترکیب ژن نوکلئوپروتیین ویروس هاری

Background: Rabies is an acute encephalitis that causes more than 60,000 deaths worldwide. The only way to save individuals bitten by a rabies-infected animal is the timely use of effective vaccines. Treatment with new generation vaccines is expensive. Therefore, there is a global movement towards the production of less expensive vaccines which retain and improve upon the quality and effectiven...

full text

همسانه‌سازی و بیان ژن نوترکیب CD40Lانسانی در رده سلولی HEK293

چکیده سابقه و هدف CD40L ، پروتئینی غشایی و یکی از اعضای خانواده TNF است که نقش مهمی در انتقال پیام سلولی در ایمنی ذاتی و تطبیقی دارد. از آن جایی‌که این پروتئین نقش خود را از طریق تجمع گیرنده در سطح سلول هدف ایفا می‌کند، به ‌نظر می‌رسد فرم مالتی‌‌مری آن بتواند اثر قوی‌تری نسبت به فرم طبیعی ترایمری ایجاد کند. بر ‌این اساس در این مطالعه کلونینگ و بیان فرم کایمری و دودکامری CD40L محلول، از طریق پر...

full text

افزایش بیان ژن کاسپاز 3 در رده سلولی MCF7سرطان سینه تحت تأثیر عصاره هیدروالکلی سیاه‌دانه

Introduction: There are problems such as treatment failure, drug resistance, heavy costs and other problems related to cancer treatment, which cause the plants to attract the interest of many researchers, because they have fewer side effects than chemical drugs. Studies have shown that Nigella Sativa has anticancer effects but the molecular mechanism of cell death of cancer cells is not clear.&...

full text

طراحی و ساخت سازه‌ ژنی نوترکیب بیان کننده ژن حفاظت کننده سلولی

Background : Genetic manipulation is an effective strategy to protect cells against environmental damages and enhance their capabilities for therapeutic usage. In order to avoid unwanted side effects, such as cancers, the expression of genes should be temporary increased. The aim of this study was to clone and temporary increased expression of a cell protective gene, Metallothionein 1 (MT1) in ...

full text

ترانسفکشن رده سلولی PC12 بوسیله وکتور بیانی -NT4 pEGFPNIو بررسی بیان پروتئینی آن

سابقه و هدف: یکی از تکنیک‌های پایه‌ای مهم برای مطالعه یک پروتئین اختصاصی در بیولوژی مولکولی، کلون کردن و بیان آن در سلول می‌باشد. از جمله روشهای منتقل کردن ژن، روشهای غیر ویروسی است که کم‌هزینه‌تر، آسانتر و ایمنتر می‌باشند. یکی از ژن‌های مهم که کاربردهای بالینی فراوانی دارد ژن NT4 است. این ژن یکی از اعضای خانواده نوروتروفیک است و در سلول‌های گلیال سیستم اعصاب محیطی و مرکزی بیان می‌شود. این نورو...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


document type: thesis

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس - دانشکده علوم پزشکی

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023